与牛血清白蛋白的相互作用研究学院部化学与化学工程学院学号

绵阳师范大学本科论文题目芦丁与牛血清白蛋白的相互作用研究论文工作时间：2011年12月至2012年5月论文来源：国家自然科学基金项目编号：自然科学研究项目No.四川省：大学级自然科学研究项目编号：芦丁与牛血清白蛋白的相互作用 研究生导师：在Tris缓冲溶液（pH=7.4)体系中，芦丁与牛血清白蛋白的相互作用）用荧光光谱研究了水溶液中的血清白蛋白，血清白蛋白的内源性荧光（345 nm）产生强烈的荧光猝灭作用，根据芦丁在不同温度下对牛血清白蛋白的荧光猝灭作用，证明它是一种静态淬火机制. 在 290 K 和 298 KKa (分别为 4.384×103 L·mol-1、×103 L·mol-1) 计算, 主力由下式确定根据热力学参数的范德华力或氢键力。牛血清白蛋白；荧光光谱研究芸香苷与BSA的结合相互作用本科生罗涛导师邢明摘要：研究了水溶液（Tris-HCl缓冲液，pH=7.4)中芦丁与牛白蛋白（BSA）的相互作用结果表明，芦丁对BSA在345 nm处的荧光强度进行了强烈猝灭，根据不同温度下芦丁对BSA荧光强度的猝灭作用，证实了其猝灭机制为静态猝灭机制。 . 在 290 K 和 298 K 的结合常数 Ka 分别为 4.384×103 L·mol-1 和 0.7032×103 L·mol-1. 基于热力学参数，静电作用被证实为范德壁力或键。 >2 抗脂质过氧化21.2. 3 血管舒张21.2.4 抗病毒al 21.2.5 抗血小板激活因子31.2.6 抗急性胰腺炎（AP）31.2.7 对胃溃疡的保护作用4 1.3 牛血清白蛋白介绍41.4 荧光分析的特点和应用42 实验部分52.1 仪器52.2 试剂52.3 标准溶液制备 62.3.1 1 mol·L-1NaCl 水溶液62.3.2 1.0×10-4 mol·L-1 牛血清白蛋白溶液 62.3.3 运行 Tris-HCl 缓冲溶液 6 2.3.4 牛血清白蛋白溶液的制备 62.4 荧光测量62.@ >4.1 室温（290 K）测量62.4.2 298 K73 数据处理和结果讨论73.1.1 基本理论83.1.2 温度的影响 83.1.3 药物分子与蛋白质分子结合力的测定 12 结论 13 参考文献 13 致谢 16 目录注释（已删除打印时）：1、目录字体为宋小司；2、一级、二级、三级标题要明确； 3、您可以使用此目录模板，并将内容和页码替换为您自己的内容。

前言 1 芦丁简介、BSA、荧光分析1.1 芸香科植物芸香科植物芸香科全草、金丝桃科植物旱莲草全草和蓼科植物荞麦苗木简介[ 1]。图1-1 芦丁结构图1.2 芦丁的药理作用1.2.1 抗自由基活性 芦丁是黄酮类化合物，是一种清除自由基的强氧化剂。它可以终止自由基的链式反应，抑制生物膜上各种不饱和脂肪酸的过氧化，可以去除脂质过氧化产物，起到保护生物膜的药理作用。芦丁对大鼠糖尿病肾病（ND）的预防作用，结论提示芦丁可改善四氧嘧啶大鼠糖尿病肾病，其作用机制可能与抑制醛糖还原酶和消除氧自由基有关。芦丁在体外具有游离碱清除（10-2 mol·L-1抑制率31.4%）和醛糖还原酶活性抑制（10-2 mol·L-1抑制率7< @4.2%)，从而阻止葡萄糖转化为山梨糖醇，减轻大鼠山梨糖醇通路激活引起的损伤。此外，芦丁还能降低肾组织中脂质过氧化物酶（LPO）的活性，延缓氧自由基对机体的进一步损害。陈贤等[4]探讨了芦丁是否对高能冲击波引起的肾功能损害有保护作用。有学者认为体外冲击波碎石术除了产生机械效应外血清白蛋白转换，还会产生机械效应。

它还可能对基于氧自由基的肾组织细胞产生生化作用。氧自由基的产生与体外冲击波碎石术后肾功能损害有关。已证实芦丁可防止氧自由基引起的脂质过氧化，稳定细胞膜，抑制细胞膜系统中钙离子水平的异常升高，通过舒张血管平滑肌提高肾有效血浆流量（ERPF）。增加肾小球滤过率。实验证实，体外冲击波碎石术前应用芦丁，体外冲击波碎石术后血丙二醛（MDA）含量显着低于对照组，血超氧化物歧化酶（SOD）活性显着高于对照组。对照组。高，提示芦丁可以减少氧自由基，增加SOD活性。因此，芦丁通过上述药理作用发挥作用血清白蛋白转换，减轻高能冲击波对肾组织细胞的损伤，有效预防和治疗体外冲击波碎石引起的肾损伤。研究表明，缺血缺氧时大脑会产生大量一氧化氮（NO）和自由基，这可能与脑细胞的凋亡有关。例如对脑缺血损伤有一定的保护作用。它的保护作用可能与它的抗自由基作用、抗细胞凋亡和减少NO产生有关。 1.2.2 抗脂质过氧化脂质过氧化是指由活性氧自由基攻击生物膜中的不饱和脂肪酸引起的一系列氧化过程。朱建林等[5]通过测定分析大肝中SOD活性、自由基脂质过氧化产物MDA含量和脂褐质含量，发现芦丁对去势大鼠脂质过氧化具有抑制作用。 , 可抑制去势后大鼠抗氧化系统抗氧化能力的下降。

芦丁对内源性雌激素下降引起的抗氧化能力下降具有抗氧化作用。高密度脂蛋白（HDL）具有抗动脉粥样硬化作用。但HDL与低密度脂蛋白（LDL）和极低密度脂蛋白（VLDL）一样，在体外也可以被氧化修饰，一旦HDL被氧化修饰，就会引起动脉粥样硬化。孟芳等[6]在体外通过Cu2+介导的氧化修饰探索了芦丁对HDL氧化修饰的影响。结论表明芦丁能显着抑制HDL的氧化修饰。 1.2.3 血管舒张试验检测芦丁对去氧肾上腺素（PE）预收缩的胸主动脉环张力的影响，提示芦丁可能通过NO鸟苷酸环化酶途径产生内皮依赖性血管舒张[7 ]。 1.2.4 抗病毒作用研究表明芦丁对醛糖还原酶活性具有抗病毒和抑制作用。实验发现芦丁对肺指数的抑制率为27.3%，可降低流感小鼠的肺指数，具有明显的抗流感病毒作用。这与改善渗透率的报道一致 [8-9]。 1.2.5 拮抗血小板活化因子的作用 许多心脑血管疾病的发病机制，如血栓、动脉粥样硬化、炎症、缺血再灌注自由基损伤等，都与血小板-激活因子（PAF）。 ) 密切相关，因此拮抗 PAF 的作用是缓解缺血性心脑血管疾病的重要途径。

实验表明，芦丁可拮抗PAF与兔血小板膜受体的特异性结合，抑制PAF介导的兔血小板粘附，增加PMNS中游离Ca2+浓度，表明芦丁抗PAF作用的机制是通过抑制PAF受体激活，从而阻断PAF诱导的反应，从而保护心血管系统，结果表明芦丁是一种PAF受体拮抗剂[10]。 1.2.6 抗急性胰腺炎（AP）芦丁可有效预防低钙血症的发生，降低胰腺组织中Ca2+浓度。研究发现，芦丁可增加大鼠胰腺组织中磷脂酶A2（PLA2））的含量，提示芦丁可能对胰腺组织中PLA2的释放和活化有抑制作用；芦丁可有效预防胰腺组织中的低钙血症。 AP 大鼠. AP 的发生可能是通过阻止 Ca2+ 的流入和减少胰腺组织细胞中 Ca2+ 的超载, 从而减轻 AP 的病理生理损伤[11]. 赵伟中使用放射免疫法测定注射模型大鼠的血浆血栓素芦丁.B2（TXB2）、前列环素（PG12）和内皮素）含量变化。结果皮下注射芦丁可有效降低AP大鼠血清淀粉酶含量，改善大鼠病理改变。与SO组相比，AP模型组在造模后12 h的T/P比值显着高于SO组（P0疏水力△H0静电fo rce △H